柠檬酸钠与牛血清白蛋白相互作用的荧光光谱研究 - 王志军

柠檬酸钠与牛血清白蛋白相互作用的荧光光谱研究 - 王志军
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第29卷,第2期光 谱 实 验 室Vol.29,No.2 2012年3月Chinese Journal of Spectroscopy Laboratory March,2012

柠檬酸钠与牛血清白蛋白相互作用的

荧光光谱研究①

王志军② 吴群 雷海英a

(长治学院化学系 山西省长治市城北东街73号 046011)

a(长治学院生物科学与技术系 山西省长治市城北东街73号 046011)

摘 要 利用荧光光谱技术研究了柠檬酸钠和牛血清白蛋白(BS A)之间的相互作用。柠檬酸钠对BSA荧光的猝灭机制属于形成复合物的静态猝灭过程。在20.0、32.0℃和36.5℃下柠檬酸钠与BSA之间的结合常数K a分别为2.51×104、1.07×104、9.1×103L·mo l-1,结合位点数近似为1。二者结合反应的主要作用力类型为氢键或范德华力。当p H值为7.4时二者的结合作用最强,同步荧光光谱显示两者的结合位点更接近于色氨酸。同时也研究了金属离子对二者作用的影响。

关键词 柠檬酸钠;牛血清白蛋白;荧光光谱;同步荧光

中图分类号:O657.32   文献标识码:A   文章编号:1004-8138(2012)02-0847-05

1 引言

柠檬酸钠,别名枸橼酸钠,是目前工业上一种重要的原料,用途极其广泛[1]。柠檬酸钠也用作食物添加剂,主要用作调味剂、缓冲剂、乳化剂、膨胀剂、不乱剂和防腐剂等;另外,柠檬酸钠同柠檬酸配伍,用作各种果酱、果冻、果汁、饮料、冷饮、奶制品和糕点等的胶凝剂、营养补充剂及风味剂[2]。因此,研究柠檬酸钠对于人类健康有重要意义。血清白蛋白是血浆中含量最丰富的一种蛋白,在体内起着酸度保持,金属离子、氨基酸、脂肪酸、药物等的贮存、运载等重要的作用[3]。它能与进入血液中的大部分内源性和外源性物质如药物等进行可逆的结合从而起到在体内转运的作用。生物体内发生的许多重要的化学生物过程是有机小分子与生物活性大分子相互识别、作用和介导完成的。本文用荧光光谱法研究了柠檬酸钠与BSA结合作用,以探究柠檬酸钠在生物体内与蛋白质的作用机理,为其生物学效应提供一定理论依据。

2 实验部分

2.1 仪器与试剂

TU-1900型双光束紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司);F-4600型荧光光度计(日本日立公司);FA/JA型系列电子天平(上海越平科学仪器有限公司)。

牛血清白蛋白(BSA,北京奥博星生物技术有限责任公司);柠檬酸三钠(天津市风船化学试剂科技有限公司);硫酸铁、硝酸钴、硫酸铜、硫酸镍及氯化钙(天津市天达净化材料精细化学工厂),以上试剂均为分析纯。实验用水为二次蒸馏水。

①山西省高校科技开发项目(20081042);长治学院校级资助项目(2011116)

②联系人,手机:(0)135********;E-mail:w zhijun@sx u.edu.cn

作者简介:王志军(1980—),男,山西省原平市人,副教授,博士,主要从事生物无机化学研究工作。

收稿日期:2011-06-23;接受日期:2011-07-18

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